电穿孔对海藻糖载入人红细胞的作用
海藻糖是一种有效的冻干保护剂,但其为非渗透性的二糖,无法自由进入细胞内部,起到很好的保护作用。一直以来人们采用多种办法使其载入细胞内部,但是效果一直不佳。电穿孔作为一种很好的物理方法,可以将不可渗透性的外源分子载入细胞内部且不伤害细胞,它在转基因、遗传方面有着广泛的应用。我们采用此方法将海藻糖载入红细胞内部,通过正交实验,分析出细胞外海藻糖浓度、电脉冲的频率、电压、脉宽等因素对海藻糖载入效果的影响程度。并且找到了最佳的电脉冲条件:细胞外海藻糖浓度为800mM、电压为300v,脉宽1ms、频率为4次/min。此条件下,细胞内的海藻糖浓度可以达到63.68mM。
电穿孔 红细胞 海藻糖 冷冻干燥 冻干保护剂 正交实验
刘建峰 周新丽 周国燕 郭柏松
上海理工人学低温生物与食品冷冻技术研究所,上海 200093 上海东富龙科技股份有限公司 冻干工艺研究室 上海 201109
国内会议
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25-29
2008-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)