H3N8马流感病毒单重与双重荧光RT-PCR检测技术研究
本研究利用2对引物和2条不同荧光素双标记探针(FAM,HEX)分别建立了检测马流感病毒H3N8亚型的单重和双重TaqMan荧光RT-PCR快速检测方法.其中的单重检测方法与鸡胚病毒分离方法的灵敏度一致,双重方法略低于鸡胚分离鉴定方法.单重和双重方法均可在3h左右可作出结果,不仅适于马科动物各种组织样本中马流感病毒H3N8亚型的检测,也可用于活体样本中马流感病毒H3N8亚型的快速检测.为实现对临床样品中病毒RNA量的相对定量,对连续10倍稀释的病毒RNA样品进行检测,对Q值和样品中病毒RNA的量进行线性回归.结果显示,病毒RNA的量与试验测得的Ct值呈线性相关,表明建立的方法可用于病毒RNA量的确定.通过时马动脉炎病毒及其它亚型的流感病毒(包括猪源H1、人源H3、禽源H5、H9亚型病毒)进行检测,表明建立的方法特异性强.分别采用荧光RT-PCR方法和病毒分离鉴定方法对17份马拭子样品和21份驴拭子样品进行了检测,结果显示荧光RT-PCR试验结果同病毒分离鉴定检测结果完全相符.
马流感 多重荧光 流感病毒 病毒鉴定
高志强 赖平安 刘月焕 柏亚铎 乔彩霞 谷强 林健 韩春华
北京出入境检验检疫局,北京,101113 北京市农林科学院,北京,100089
国内会议
中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
广州
中文
250-258
2008-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）