高致病性猪蓝耳病病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法的建立与初步应用

摘要：

根据高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)的NSP2基因序列设计合成引物和TapMan荧光探针,建立了高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR检测方法.该方法灵敏度比常规RT-PCR高100倍,对PRRSV细胞培养物的检测下限可达1个TCID50；特异性强,仅能特异性的检测出高致病性猪蓝耳病病毒；同时根据灵敏度实验建立的标准曲线能够对PRRSV RNA进行相对定量.用该方法对收集的正常临床样本和2007年某发病猪场送检的猪血清和多种组织样品进行检测.结果发现,高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR方法与病毒分离方法的阳性符合率为100％,且通过对阳性病料中不同组织感染RNA的相对定量,初步探讨了PRRSV在猪体内的感染规律.通过对临床样本的检测,表明建立的高致病性猪蓝耳病荧光RT-PCR方法具有良好的特异性和重复性,可应用于高致病性猪蓝耳病的检测,满足当前对麟疫情的防控需要.

关键词： 猪蓝耳病病毒 荧光探针 基因序列 序列设计 病毒分离

作者: 蒲静 张伟 赖平安 张鹤晓 杨汉春 汪琳 柏亚铎 高志强 吴丹 乔彩霞

作者单位: 北京出入境检验检疲局,北京,101113 中国农业大学,北京,100193

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会2008年学术年会暨第六届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 227-230

在线出版日期: 2008-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）