猪囊尾蚴TS-CC18蛋白的原核表达及其血清学检测效果评价
目的：制备猪带绦虫囊尾蚴TS-CC18重组抗原并对其生物学活性进行鉴定，为建立猪囊尾蚴检测技术提供诊断抗原。 方法：PCR扩增获得TS-CC18编码基因，构建pET30a-TS-CC18重组表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导筛选高表达量菌株。表达蛋白采用Ni-FF亲和层析方法纯化。通过Western－blotting及间接ELISA检测重组蛋白的反应活性。 结果：Tricine-SDS-PAGE表明，0.5 mmol/L IPTG诱导6h，可稳定表达可溶性TS-CC18重组蛋白；薄层扫描分析其表达量约占菌体总蛋白的20％以上。Westem-blotting检测诱导的蛋白能与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应。间接ELISA检测血清抗体结果表明：纯化的TS-CC18重组蛋白与全囊抗原的相对特异性达到100％，相对敏感性达84％。总符合率为94.3％，表明TS-CC18重组蛋白具有较高的特异性和敏感性。 结论：成功制备了猪囊尾蚴TS-CC18重组抗原，特异性、敏感性及稳定性良好，对诊断猪囊尾蚴病及开发诊断制剂具有潜在应用价值。
猪尾蚴病 尾蚴检测 重组抗原 血清抗体
张少华 才学鹏 贾万忠 骆学农 郑亚东 景志忠 刘红霞 赵松波
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验甘肃省动物寄生虫病重点实验室 兰州 730046
国内会议
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339-342
2008-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）