周期型马来丝虫肌球蛋白部分编码基因Bm-M55的克隆与真核表达
根据Bm-M55基因序列设计引物,以周期型马来线虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因.用TA克隆方法将目的基因克隆至载体pGEm-T Easy中,经PCR和双酶切鉴定并测序后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1 (+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Bm-M55,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)对获得重组蛋白Bm-M55进行分析和鉴定.结果:转染的COS-7细胞高水平表达Bm-M55的mRNA.根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的一致,重组蛋白Bm-M55分子量约为55 000.
马来丝虫 肌球蛋白 真核表达 COS-7细胞 Bm-M55基因 TA克隆
方政 谢东方 黄为群 沈勤 童海燕 徐邦生
江苏省南通市启秀路19号 南通大学医学院寄生虫学教研室,226001
国内会议
郑州
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356-361
2008-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）