PEI载体介导的hTERT反义寡核苷酸抑制A549细胞增殖活性的研究
目的:以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体(polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的影响. 方法:采用MTT法检测PEI/ASODN纳米复合物对细胞的增殖作用情况;激光共聚焦显微镜检测5”-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米复合物的摄入情况胞摄入情况;RT-PCR法检测转染后hTERT mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达;流式细胞术Annexin-v-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况. 结果:40 μg/ml的PEI/ASODN纳米复合物转染细胞后产生良好的生长抑制作用;5”-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后,PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质,而单纯FASODN组细胞内无明显荧光;RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米复合物作用于A549细胞72h时,hTERT mRNA水平明显降低,与CELL组相比有显著差异(P＞0.05);细胞hTERT蛋白的表达也显著降低,与RT-PCR结果具有一致性;转染72h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53％和54.28％. 结论:PEI介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖,使hTERT mRNA水平明显降低从而抑制hTERT蛋白的表达,使细胞产生凋亡,对该细胞生长有明显抑制作用.
聚乙烯亚胺 反义寡核苷酸 端粒酶逆转录酶 PEI载体介导 hTERT蛋白表达 A549细胞增殖 抑制作用
付蕾 王志平 张振中 周建超 刘蕾 黄领领
郑州大学药学院,河南郑州 450001 郑州人民医院药剂科,河南郑州 4502003 郑州大学第三附属医院药剂科,河南郑州 450052
国内会议
郑州
中文
426-434
2008-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）