小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠和鹅中和抗体初报
PCR扩增小鹅瘟病毒(Goose Parvovirus,GPV)CHv株VP3基因并克隆入pMD 18-T-Simple载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒pcDNA3.1(+)CMV启动子下游多克隆位点,经PCR和HindⅢ与BamH Ⅰ双酶切鉴定表明成功构建了GPV VP3基因疫苗(pcDNA3.1-GPV-VP3)。该疫苗以200μg/只肌注免疫Balb/c小鼠和鹅,同时分别设肌注PBS和pcDNA3.1(+)作为对照,于免疫后第30、45、60、75、90、105天应用鸭胚原代成纤维细胞(DEF)进行微量中和试验检测小鼠和鹅血清抗100TCID50 GPV的抗体效价。结果表明,pcDNA3.1-GPV-VP3免疫小鼠第30天可检测到抗GPV的中和抗体,抗体效价缓慢上升至90天达到高峰(平均1:135.8)后下降,105天仍高于75天;免疫鹅的中和抗体效价呈现与小鼠类似的规律,第90天达到高峰(平均1:98.5)。因此,pcDNA3.1-GPV-VP3具有良好的免疫原性,肌注免疫小鼠和鹅后能够诱发产生抗GPV的中和抗体,有进一步开展临床研究和应用的前景。
小鹅瘟病毒 真核表达质粒 基因免疫 中和抗体
韩新锋 程安春 汪铭书 刘晓东 卢菲 黎敏 车茜
四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安,625014 四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安,625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安,625014 四川农业大学动物微生态生物工程研究中心,四川雅安 625014 四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安,625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安,625014
国内会议
中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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2008-04-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)