特异性DNA序列建立种特异性FQ-PCR快速检测肠炎沙门氏菌

摘要：

根据肠炎沙门氏菌(SE)种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针,首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法。该法在SEDNA含量为9×108～9×104copies有较好的线性关系；检测SEDNA模板的灵敏度为4copies/μL,检测SE细菌数的灵敏度为6 CFU/mL；特异性试验表明只对SE基因组呈阳性反应。分别应用该技术和传统细菌分离法检测60份来自人工感染鸭、小白鼠和肉兔的心、肝、脑和直肠粪便,结果显示两种方法对心、肝、直肠粪便的阳性检测结果符合率为100％,而FQ-PCR对脑的阳性检测率极显著高于细菌分离。研究结果表明,该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测,可用于SE分离鉴定、SE感染疑似病例检测、SE体内动态分布规律研究及其分子流行病学调查。

关键词： 肠炎沙门氏菌 聚合酶链式反应 快速检测 分子流行病学

作者: 邓树轩 程安春 汪铭书 曹平 朱德康 陈孝跃

作者单位: 四川农业大学动物医学院 禽病防治研究中心,四川 雅安,625014 四川农业大学动物医学院 禽病防治研究中心,四川 雅安,625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川 雅安,625014 四川农业大学动物微生态工程研究中心,四川 雅安 625014 四川农业大学动物医学院 禽病防治研究中心,四川 雅安,625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川 雅安,625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛

会议地点: 河南新乡

会议语种:中文

页码: 131-136

在线出版日期: 2008-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）