野生革耳(Panus rudis)漆酶的异源表达和酶学性质改良
本研究以野生革耳(Panus rudis )漆酶(lcc)为对象，探讨漆酶的异源表达及酶学性质改良。首先在漆酶基因lcc的3”端添加了编码5个氨基酸的酵母偏爱密码子，得到了突变体基因1ccT，将它连接到毕赤酵母表达载体pPICZaA中，转化毕赤酵母进行分泌表达，获得了重组野生型漆酶突变体LCCT。结果表明，LCCT的表观分子量约为61.6 kDa，以ABTS为底物时的最适反应pH值为2.6，最适温度为450Co氧化 ABTS的Km值为0.61 mmoUL，对应的Vmax为12.21 ”mol/min;在60℃的半衰期为8min；在50℃保温1h保留酶活71％，50℃以下保温1h保留酶活均大于80％；且C一端序列对其活性有较大影响。诱导表达漆酶LCCT经过分子筛和离子交换层析得到电泳纯的漆酶蛋白LCCT, pH4.5时的比活力为3.68U/mg。
野生革耳 漆酶 异源表达 酶学性质
杨建强 刘刚 汤国营 戴红梅 朱厚础
军事医学科学院生物工程研究所,北京100071
国内会议
昆明
中文
53-53
2007-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）