螺旋藻多糖的分离纯化及免疫活性
目的:观察螺旋藻多糖的免疫活性,并对其构效关系进行初步研究。 方法:用水提取钝顶螺旋藻干粉,水溶部分用不同比例的丙酮沉淀,沉淀部分加水溶解,去蛋白,透析冻干,得SPPA、SPPB、SPPC 3个组分。SPPC经Sephadex G-75和CM-sephadex C-50柱层析,得多糖化合物SPPC Ⅰ-1。 结果:SPPA、SPPB、SPPC的得率分别为2.64%、1.11%和2.10%,总得率为5.85%。中性糖含量分别为55%、28%和22%。毛细管电泳(254 nm和210 nm检测)和高效液相色谱鉴定发现SPPA、SPPB、SPPC出现多个峰;元素分析结果表明,SPPA、SPPB、SPPC的N、C、H含量分别为:SPPA:5.55%、38.28%、6.08%;SPPB:6.44%、35.27%、5.50%; SPPC:10.25%、42.08%、6.29%。SPPC Ⅰ-1经高压液相色谱和毛细管电泳鉴定为均一性组分,凝胶过滤法测得分子量为7.4×104,糖组成分析表明其主要由鼠李糖组成,还含有少量的葡萄糖,摩尔比为Rha:Glc=6.24:10。元素分析表明,SPPC Ⅰ-1含碳42.59%,氢8.07%,红外光谱分析表明,SPPG-1含α-型糖苷连接键。脾细胞增殖反应测定其免疫活性,结果表明SPPA、SPPB、SPPC在10~100μg·ml-1剂量范围内,单独使用和与Con A合用均明显促进小鼠脾细胞增殖反应,并有一定剂量效应关系,3个样品作用强度相近;与LPS合用时对脾细胞增殖反应作用不明显。SPPC Ⅰ-1对脾细胞增殖反应具有与SPPC相似的作用,在等剂量条件下比SPPC作用较强。 结论:从螺旋藻干粉中提取得到3个多糖组分SPPA、SPPB和SPPC,它们均含有多个组份,并可能以糖蛋白的形式存在,SPPC Ⅰ-1为均一性多糖组分。SPPA、SPPB、SPPC和SPPC Ⅰ-1均具有促进淋巴细胞增殖反应的免疫活性,在等剂量条件下纯品SPPC Ⅰ-1比SPPC作用较强。
螺旋藻多糖 糖蛋白 分离纯化 构效关系 免疫活性 实验药理
程军平 王仲孚 赵修南 齐春会 田庚元 张永祥
军事医学科学院毒物药物研究所,北京 100850 中国科学院上海有机化学研究所,上海 200032
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2003-10-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)