鲮两种生长因子的克隆及在大肠杆菌中的表达
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体和肝脏组织中分别克隆出生长激素和胰岛素样生长因子-IcDNA片段，克隆的mcGH全长567bp，编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽；IGF-I全长536bp，包括50bp的5’非编码序列和一个486bp的开放阅读框，E区域分析表明所克隆的鲮IGF-Ⅰ属于Ea2亚型。构建了表达载体pQE30-mcGH和pQE30-IncIGF-I，转化大肠杆菌M15pREP4，实现了鲮mcGH和mcIGF-Ⅰ在大肠杆菌中的高效表达，表达的重组蛋白分别占菌体总蛋白的32.13％和34.0r7％，经westernblotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH和mcIGF-Ⅰ。表达产物主要以包涵体的形式存在。重组蛋白变性、复性后，经Ni-chelating Sepharose亲和层析纯化，SDS-PAGE显示，纯化的mcGH和mcIGF-Ⅰ纯度分别约为94％和81％。纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼Oreochromis mossambicus，经4周处理后，实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38％和9.75％，体重增长率分别快23.42％和62.48％。经t检验统计分析表明，表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用。
鲮 生长激素 生长因子 大肠杆菌
江世贵 张殿昌 苏天凤 周发林 吕俊霖
中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 510300
国内会议
浙江舟山
中文
991-997
2003-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）