HPLC法测定人血红细胞巯基嘌呤甲基转移酶的活性
目的：建立一种简便的人血红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性的HPLC测定方法。 方法：以6-硫鸟嘌呤(6-TG)作为底物，S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体，TPMT催化6-TG生成甲基化产物6-甲基硫鸟嘌呤(6-MTG)，100℃加热终止反应并沉淀蛋白后，加60％高氯酸再次沉淀蛋白，离心后，20ul进样检测。色谱柱：Shim-packCLC-ODS(6mm×150mm，5m);流动相：甲醇-水-三乙胺(24：76：0.4)，磷酸调pH至4.8;流速：1.0mL·min-1;检测波长：313nm。 结果：该方法在100～1700ng·mL-1浓度范围内线性良好，相关系数r=0.9997，高、中、低浓度质控样本的日内、日间RSD为2.28％～6.48％，回收率为100.56％～118.71％(n=5)。 结论：该方法精密度高、准确度好、稳定、可靠、简便，适合临床大规模推广应用。
巯基嘌呤甲基转移酶 高效液相色谱 血红细胞
毛晨梅
苏州大学附属儿童医院，江苏，苏州，215003
国内会议
浙江温州
中文
86-90
2008-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）