“恐伤肾”实验深入及筛选的基因分析
目的：采用抑制消减杂交法(SSH)筛选“恐伤肾”的差异表达基因，发现与应激肾虚相关的一组表达基因，以拓展肾虚证的分子生物学研究广度。 方法：结合使用“猫吓鼠”与“反吊荡水”两种方法，造“恐伤肾”应激肾虚的动物摸型。建模前后眼底静脉丛采血，提取总RNA，用SMLART技术逆转录并扩增总cDNA。再应用抑制消减杂交法(SSH)筛选差异表达基因，选择性的扩增目标cDNA片段，同时抑制非目标片段扩增。 结果：通过高纯度的RNA获得和总cDNA的合成，进而取得了惊恐应激致肾虚的10个差异基因图谱，图谱中补肾治疗组更接近对照组，优于惊恐肾虚组。在这10个差异基因图谱中，回收测序的第一批有β血红蛋白基因(HBB)、α血红蛋白基因(HBA)、苯丙氨酸一tRNA、缬氨酸一tRNA、亮氨酸一tRNA基因及12s rRNA、 16s rRNA基因等7个基因表达谱。 结论：通过SSH新发现的7个惊恐应激功能基因(即与肾虚相关的表达基因)，与从OMIM中检索到的与恐惧相关基因有所不同，这为深入研究肾虚证提出了新的问题。SSH结合基因芯片技术，可望对中医肾虚证复杂分子机理进行探索的提供良好前景。
恐伤肾 恐惧基因 抑制消减杂交 差异表达基因 肾虚证 分子生物学
王米渠 王刚 杨红亚 王儒芳
成都中医药大学 四川大学 四川成都 610064 成都中医药大学 四川成都 610075
国内会议
“情绪与健康和疾病及其中医药干预”国际学术研讨会暨中医基础理论分会第一届学术年会
青岛
中文
226-235
2007-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）