利用宏基因组技术定向筛选抗生素产生菌的方法学建立
目的：为了快速从土壤中定向筛选抗生素产生菌,本研究利用宏基因组技术进行了土壤中抗生素产生菌的快速筛选方法的摸索和研究。 方法：建立了用液氮冷冻法和PVPP柱层析法的提取纯化方法,利用6种不同土质的土壤进行了方法验证,并利用Herbimycin产生菌掺入土壤进行了抗生素产生菌筛选方法学的验证。 结果：经提取和纯化后,每克湿土可得到32.25—61.25μg DNA,片段大小为23.1kb左右,基因组DNA样品被证明完整、可适用于后期的分子操作.每克湿土掺入103个Herbimycin产生菌,经土壤基因组DNA提取和纯化后,利用基于合成基因簇设计的特定引物可以从中扩增出目标条带.同时被掺入土壤菌体可以重新被分离纯化出来。 结论：本研究建立了一种快速的定向抗生素产生菌筛选方法,该方法快速、灵敏,比传统的筛选方法减少了大量繁重的工作量,为微生物新药的开发建立一种全新研究方法。
土壤宏基因组 抗生素产生菌 定向筛选 DNA提取 基因筛选 液氮冷冻法 提取纯化 微生物新药
栗若兰 郑智慧 张华 路新华 贺建功
华北制药集团新药研究开发有限责任公司 微生物药物国家研究工程中心,河北石家庄050015
国内会议
北京
中文
180-183
2008-05-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）