人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK肿瘤细胞特异性表达载体的构建

摘要：

目的:构建人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子调控自杀基因HSV-TK的肿瘤细胞特异性表达载体。为进一步研究以hTERT启动子作为转录调控元件的肿瘤靶向性基因治疗奠定基础。 方法:(1)用TK基因取代质粒pGL3-hTp和pGL3-Control的荧光素酶基因,分别构建hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK,并用酶切和PCR两种方法对重组质粒进行鉴定;(2)用脂质体法将pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK瞬时转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞株A549及端粒酶阴性的人胚肺成纤维细胞株MRC-5,用RT-PCR方法检测各转染细胞中TK基因的表达情况。 结果:(1)酶切及PCR结果显示,重组质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK构建成功;(2)转染pGL3-SV40-TK的细胞A549和MRC-5均有TK mRNA表达.转染pGL3-hTp-TK的A549细胞中也有TK mRNA表达,但转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞无TK mRNA表达。 结论:hTERT启动子可以调控自杀基因HSV-TK在肺癌细胞中靶向性表达,可能是肿瘤靶向性基因治疗中比较理想的转录调控元件。

关键词： 肺癌 自杀基因 端粒酶催化亚单位 靶向性表达 基因治疗 肿瘤治疗

作者: 曾培元 唐小军 王艳萍 周清华 车国卫3 陈小禾

作者单位: 泸州医学院附属医院心胸外科 四川大学华西医院肿瘤分子诊断实验室 四川大学华西医院心胸外科

会议类型: 国内会议

会议名称: 第二届广州肿瘤大会——首届“CSCO-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 103-105

在线出版日期: 2007-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）