贝伐单抗逆转鼻咽癌耐药的实验研究
目的:药物耐受性是肿瘤化学药物治疗失败的最重要原因之一,抗血管生成是肿瘤治疗的新思路。临床观察到贝伐单抗(bevacizumab)可以使一部分化疗失败的复发/转移的肿瘤患者恢复对化疗药物的敏感性。本实验在体外研究bevacizumab对耐药肿瘤细胞的影响,探讨是否有逆转肿瘤细胞耐药的作用。 方法:以人鼻咽癌低分化细胞系CNE2及其吉西他滨(gemcitabine)耐药细胞亚系CNE2/Gem为研究对象,在体外用不同浓度的gemcitabine和,或bevacizumab处理细胞,采用四甲基偶氯唑蓝(MTT)法检测药物对CNE2和CNE2/Gem的杀伤效应,用流式细胞术测定CNE2和CNE2,Gem的凋亡率,用半定量RT-PCR法检测药物作用前后细胞中MDR1、VEGF、Bcl-2、Bax等基因表达水平的变化。采用SPSS10.0软件中One-Way Anova方法分析不同处理组间细胞杀伤率、凋亡率的差异。 结果:单用10ug/ml bevacizumab时,细胞杀伤率与空白对照组相似,两者差别无统计学意义(P=0.140),而且bevacizumab浓度增加一倍但杀伤率无明显变化,高低浓度组间差别无统计学意义(P=0.531)。但无论是20ug/ml或40ug/ml gemcitabine,联合10ug/mlbevacizumab所产生的杀伤率明显高于单用gemcitabine,差异有统计学意义(P=0.026,P=0.001)。在同样的药物处理条件下,CNE2/Gem细胞的早期凋亡率明显低于CNE2细胞(8.87±1.06％VS23.50±4.21％.P=0.005);晚期凋亡率也降低(41.70±9.78％VS60.52± 9.94％,P=0.036)。对于CNE2/Gem细胞,联合20ug/ml gemcitabine和10ug/ml bevacizumab处理24h所诱导的早期凋亡率比单纯20ug/ml gemcitabine明显增高(39.87±5.85％VS 8.87±1.06％,P<0.001);而晚期凋亡率变化不大(37.64±5.11％VS 41.70±9.78％,P=0.582)。半定量RT-PCR方法检测显示CNE2、CNE2/Gem和CNE2/Gem/Bev中MDR1相对表达量分别为0.623、1.364和1.165,VEGF分别为0.241、1.652和1.547,Bcl-2分别为0.613、0.952和0.135,Bax分别为0.665、0.387和1.751。 结论:Bevacizumab可以显著增加人鼻咽癌吉西他滨耐药细胞系CNE2/Gem对gemcitabine的敏感性。单用bevacizumab杀伤作用不明显,与gemcitabine联合可明显提高gemcitabine的细胞杀伤活性,但增加bevacizumab浓度并不能提高杀伤率。耐药细胞CNE2/Gem与其亲本细胞CNE2相比早期凋亡细胞明显减少,而bevacizumab能增加耐药细胞的早期凋亡。Bevacizumab对耐药相关基因影响不大,但可以显著影响凋亡相关基因的表达,促进耐药细胞凋亡。
鼻咽癌 吉西他滨 药物耐受性 贝伐单抗 化学药物治疗 肿瘤治疗
刘辉 罗荣城 孙婷婷 杨小民
广州南方医院肿瘤科 510515 解放军201医院骨科 111000
国内会议
第二届广州肿瘤大会——首届“CSCO-南方”肿瘤生物治疗与分子靶向治疗论坛、第六届全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会
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2007-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）