用MACS技术从大肠癌组织中分离大肠癌干细胞样细胞
目的:建立和优化从原代大肠癌组织中分离大肠癌干细胞样细胞方法,并初步探讨大肠癌干细胞样细胞与普通大肠癌细胞基因表达谱的异同。 方法:新鲜大肠癌组织先用胶原酶和透明质酸酶消化成单个细胞悬液,再用MACS技术从细胞悬液中分离出CD133<”+>/EMA<”+>/CEA<”+/->阳性的大肠癌干细胞样细胞,接种含MEF饲养细胞的平皿,原代培养后收集细胞,提取mRNA经线性放大后,用Affymetrix U133 plus 2.0cDNA表达芯片分析大肠癌干细胞样细胞与普通大肠癌细胞基因表达谱的异同,根据芯片分析结果经验证后,用PCR从HT-29细胞cDNA文库中克隆该基因,构建真核细胞表达质粒表达载体,转染大肠癌细胞株,分析该基因对细胞主要信息通路的影响。
大肠癌 基因表达 肿瘤干细胞 原代培养
朱永良 王展怀 钟献 丁克峰 郑树
浙江大学医学院附属第二医院 杭州,310009
国内会议
杭州
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2007-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）