胶质瘤干细胞基因组DNA和cDNA差异基因表达谱的建立及分析
目的:深入探索胶质瘤干细胞和正常人神经干细胞在基因组DNA水平和cDNA表达谱水平的分子差异,为探索胶质瘤发生的分子病因提供参考依据。 方法:以CD133免疫磁珠从新鲜人脑胶质瘤手术标本中分离CD133<”+>的胶质瘤干细胞,并经流式细胞仪检测阳性细胞纯度。同法从人工流产的人胎脑组织中分离纯化CD133<”+>的神经干细胞。分别抽提两种细胞基因组DNA后,采用包含2632个人BAC克隆的比较基因组杂交芯片(CGH array),从全基因组水平检测两种细胞的基因谱差异,并进行相关生物信息学分析。还抽提两种细胞总RNA,采用Affymetrix基因表达谱芯片建立两类细胞的差异基因表达谱,并经实时定量PCR验证。 结果:以CD133免疫磁珠法分离CD133<”+>细胞(胶质瘤干细胞和神经干细胞),所获得的细胞纯度为87％-94％。CGH array,结果显示,在2457个分布于非性染色体的克隆中,与正常神经干细胞相比较,共有132个克隆发生DNA拷贝数的改变。
胶质瘤 分子病因 神经干细胞 流式细胞仪 细胞纯度 生物信息学 肿瘤干细胞
董军 王中勇 沈云天 陈宝敏 黄强
苏州大学附属第二医院神经外科,215004
国内会议
杭州
中文
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2007-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）