抗狂犬病病毒糖蛋白单链抗体的表达、纯化、复性与生物活性研究

摘要：

构建抗狂犬病病毒糖蛋白单链抗体原核表达质粒,将重组质粒转化表达宿主菌E.coli BL-21,IPTG诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,采用连续梯度透析方法对提取的包涵体进行复性,分别以疏水作用层析、离子交换层析及凝胶过滤层析纯化目的蛋白,ELISA检测ScFv与病毒感染细胞结合活性。结果:经IPTG诱导,目的蛋白获得高效表达,最优表达条件为0.5mMIPTG 25℃诱导5h,蛋白表达量占菌体总蛋白的31％。连续梯度透析复性后,可溶蛋白浓度为600μg/mL。经三步纯化后,目的蛋白纯度达94％。ELISA结果表明:ScFv与病毒感染细胞具有良好的结合活性。

关键词： 狂犬病病毒糖蛋白 单链抗体 原核表达 生物活性

作者: 王化磊 夏成柱 杨松涛 王承字 冯娜 郑学星 李群 孙培录

作者单位: 军事医学科学院军事兽医研究所 长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院 长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所 长春 130062 军事医学科学院军事兽医研究所 长春 130062 吉林大学畜牧兽医学院 长春 130062 长春理工大学生命科学院 长春 130000

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十二届全国养犬学术研讨会

会议地点: 深圳

会议语种:中文

页码: 206-209

在线出版日期: 2007-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）