表达PRRSV GP4和GP5双表位多串联肽的真核重组质粒在小鼠的免疫效应
采用重叠区扩增基因拼接法(gene splicing by overlapextension, gene SOEing)技术,将编码PRRSV美洲型毒株BJ-4的GP4的aa33~70(E4)和GP5的aa29~60(E5)核苷酸片段进行串联,获得两个多表位串联基因E54-2和E54-4。将这2个基因分别克隆至pcDNA3.1(+),构建出真核表达重组质粒pcDNA3-E54-2和pcDNA3-E54-4,将其分别转染P815细胞,间接免疫荧光试验表明,重组质粒在真核细胞中能稳定表达目的蛋白。用这2种真核表达重组质粒分别免疫小鼠均能诱导体液免疫反应,产生特异性的抗GP4和GP5抗体;4免后3周,免疫小鼠血清中和抗体效价分别为1:16和1:28。重组蛋白GST-GP4和GST-GP5能够阻断其对PRRSV的中和能力。证明了所选表位是中和表位。该实验结果对设计PRRSV表位疫苗具有理论指导意义。
PRRSV GP4 GP5 表位 免疫反应 小鼠
付利芝 杨汉春 郭鑫
中国农业大学农业部预防兽医学重点实验室,北京 100094
国内会议
重庆
中文
654-661
2005-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）