会议专题

大肠杆菌植酸酶appA的融合表达及耐热性研究

目的:研究大肠杆菌植酸酶appA基因在pET32a(+)中的融合表达,获得活性高、耐热性强的植酸酶。 方法:提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因appA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1299个核苷酸。将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA。对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG浓度诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上。在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度。 结论:融合表达的植酸酶的耐热性得到提高。

大肠杆菌 植酸酶 重组appA 耐热性

乔代蓉 徐辉 白林含 曹毅

四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室 四川省生物信息与代谢工程共享实验平台,四川成都 610000

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2005-09-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)