多重PCR--基因芯片技术检测多种人疱疹病毒
目的:建立可同时检测单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1、HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、人巨细胞病毒(CMV)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)和人类疱疹病毒6型(HHV-6A、HHV-6B)等多种人疱疹病毒的多重PCR-基因芯片技术。 方法:以人疱疹病毒DNA多聚酶基因区为靶序列,设计引物及寡核苷酸探针,并将探针固定于经特定修饰的玻片上,制成基因芯片;标本经PCR扩增并CY5荧光标记后,与基因芯片进行杂交,洗脱后激光扫描读片。 结果:7种人疱疹病毒经PCR扩增后产物为224-252bp,与基因芯片杂交后可鉴别分型,其最低检出浓度为101拷贝/μl,细菌、真菌、乙肝病毒及人基因组DNA等无交叉反应。用该多重PCR-基因芯片技术对临床疑为病毒感染的129份血标本进行检测,共检出48份阳性标本,与TaqMan荧光定量PCR法比较,其敏感度为95.6%,特异度为98.8%,且5份阳性标本的测序结果均与检测结果相符,35例正常健康儿童的血标本检测均为阴性。 结论:建立的多重PCR-基因芯片技术,可同时检测7种人疱疹病毒,且特异敏感、快速简便,可望为临床早期、准确诊断人疱疹病毒的感染提供有效方法。
多种人疱疹病毒 多重PCR 基因芯片检测 临床早期诊断
郑之北 俞锡林 吴亦栋 尚世强
浙江大学医学院附属儿童医院中心实验室,310003
国内会议
浙江舟山
中文
2007-05-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)