重组人心肌肌红蛋白基因工程菌的构建
目的:构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白(rhMb)的基因工程菌株,为临床检测早期心肌损伤及预后提供诊断试剂,促进肌红蛋白诊断标准化的研究。 方法:采用RT-PCR技术从人心肌组织总RNA中克隆出全长的人心肌肌红蛋白基因,将其插入到PMD18-T simple克隆载体中,转化DH5α克隆菌株。经酶切和测序对目的基因分析,再插入到pET-21a(+)表达载体中,转化BL21(DE3)。对诱导表达的目的蛋白行SDS-PAGE和运用锐普心梗仪检测重组蛋白的抗原性并准确定量。 结果:测序表明RT CR所得的肌红蛋白基因hMb序列与GenBank(NM 005368.2)中报道的序列一致,目的蛋白表达量达菌体总蛋白的15％,重组蛋白抗原性良好。 结论:成功构建了稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白基因工程菌株。
心肌肌红蛋白 基因工程菌 心肌损伤 诊断试剂
张欣 张春明 王德芝
中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所分子核医学研究室,天津,300192
国内会议
天津
中文
276-280
2007-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）