鸡β-防御素-11(Gal-11)cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

本文运用RT-PCR技术,从崇仁麻鸡肾脏总RNA中扩增出片断大小为315bp的鸡Gal-11编码cDNA序列全长。以pET32a为表达质粒构建了重组质粒pET32a-Gal-11,并在BL21(DE3)pLySs中进行融合表达。诱导剂IPTG在0.2～1.2mM的对重组蛋白的产量无明显影响,加入诱导剂1h开始可检出量重组蛋白质表达,在2h时其表达水平已接近最大量。融合表达蛋白经过初步分离、变性、组氨酸亲和层析柱纯化以及复性,对纯化的表达蛋白进行琼脂糖弥散试验检测生物学活性。结果表明纯化蛋白对大肠杆菌、白色念球菌、金黄色葡萄球菌没有产生抗菌活性。崇仁麻鸡Gal-11在pET32a质粒表达体系中成功表达为鸡防御素多肽下一步的研究奠定基础。

关键词： 崇仁麻鸡 β-防御素-11 cDNA克隆 原核表达 蛋白纯化 生物学活性

作者: 蒋瑞瑞 王彦彬 康相涛 孙桂荣 陈其新 韩瑞丽 田亚东 李国喜

作者单位: 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450002 河南农业大学牧医工程学院,河南郑州 450002;河南省家禽种质资源创新工程研究中心,河南郑州 450002

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十三届全国家禽学术讨论会

会议地点: 郑州

会议语种:中文

页码: 334-340

在线出版日期: 2007-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）