人Egr-1启动子调控的自杀基因真核表达载体的构建及其在鼻咽癌细胞株中的放射诱导表达
目的：构建由人Egr-1放射诱导性启动子调控的自杀基因靶向性真核表达载体,并转染人鼻咽癌细胞株CNE,比较射线诱导前后自杀基因在鼻咽癌细胞中的表达的情况,为临床肿瘤放射基因治疗奠定实验基础。 方法：根据Genebank数据库提供的人Egr-1启动子基因序列,设计一对引物克隆人Egr-1启动子,采用PCR、酶切、连接等分子生物学技术,构建pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组质粒表达载体,并利用脂质体转染的方法转染人CNE细胞株,经G418筛选后获得阳性细胞克隆,RT-PCR分析鉴定不同的放射剂量0、5、10、15、20Gy五种剂量进行6MVX线照射对CD基因的表达的影响。 结果：经PCR、酶切、测序等证实了pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组靶向性质粒表达载体构建成功,G418筛选所得到的CNE细胞阳性克隆经不同放射剂量的诱导后,RT-PCR结果显示体外放射线照射可显著提高CNE细胞中CDmRNA的表达水平.而在10Gy及15Gy组CDmRNA的表达水平明显增高,尤以15Gy组CDmRNA的表达水平最高,而在20Gy组CDmRNA的表达水平反而下降。 结论：pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组质粒表达载体构建成功,并成功转染入鼻咽癌细胞株,建立了基因表达与放射的剂量效应关系,为后续的临床应用研究奠定基础。
鼻咽癌 Egr-1启动子 自杀基因 真核表达载体 放射诱导
吴君心 谢云青 邱素芳 郑秋红 潘建基
福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院放疗科 福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤研究所肿瘤分子生物学研究室350014
国内会议
第二届泛珠江三角区放射肿瘤学术大会暨四川省第四届放射肿瘤专委会第三届年会
成都
中文
27-31
2007-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）