犬瘟热病毒南京分离株核蛋白基因的克隆与表达

摘要：

以犬瘟热病毒南京分离株(CDV-NJ15)为模板,设计两对引物,分段扩增得到了N基因上下游的981bp和702bp两个片段,将其分别T-A克隆到pMD 18-T载体后,再亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,然后将重组质粒转化进宿主菌BL21中,在37℃ 1mM IPTG诱导下两个片段均获得良好的表达。经SDS-PAGE鉴定,其表达的融合蛋白约56.1kD和44.8kD,与预期值一致。免疫转印试验显示,两个重组蛋白均可被CDV Onderstepoort株兔抗血清识别,表明该重组蛋白具备天然N蛋白的部分抗原性。为探索更为敏感的诊断方法和研制CDV新型疫苗创造条件。

关键词： 犬瘟热病毒 N基因 基因克隆 基因表达 免疫转印 分离鉴定

作者: 袁文 缪勤 张汇东 徐汉坤 陆承平

作者单位: 南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏南京 210095;广东省实验动物监测所,广东广州 510260 公安部南京警犬研究所,江苏南京 210012 南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏南京 210095

会议类型: 国内会议

会议名称: 第七届中南地区实验动物科技交流会

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 418-424

在线出版日期: 2007-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）