猪抵抗素(resistin)表达载体的构建、表达及表达产物的纯化鉴定

用 PCR方法扩增到抵抗素基因(RSTN)并将其亚克隆至pET-32a(+)表达载体,获得重组质粒pET-RSTN。将重组质粒转化大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测结果表明,重组resistin蛋白分子量大小约30kDa。对表达条件如温度、IPTG浓度及诱导时间进行优化并用SDS-PAGE检测。结果表明,30℃、4h、IPTG浓度为1mmol/L时,可溶性重组resistin的含量最高。表达产物经Western blot检测证实是resistin蛋白,并用镍离子亲和层析的方法获得纯化的resistin蛋白。
抵抗素基因 蛋白表达 纯化鉴定 PCR方法扩增 resistin蛋白
冷扬 刘铀 刘艳芬 王群 潘颖斌 高志杰
广东医学院实验动物中心,广东 湛江,524023;广东海洋大学现代生物化学中心,广东 湛江,524088 广东海洋大学现代生物化学中心,广东 湛江,524088 广东海洋大学农学院,广东,湛江,524088
国内会议
广州
中文
370-377
2007-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)