细菌对氯霉素类药物耐药基因的三重PCR检测试剂盒的研究
氯霉素类药物包括氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考。虽然氯霉素和甲砜霉素已经陆续被各个国家禁止在临床上使用，但氟苯尼考所具有的抗菌作用强、毒副作用小等特点使得该药的得到广泛的使用，因此此类药物的耐药性被受关注。本研究根据Genbank上发布的细菌氯霉素类耐药基因Cat1、FloR、CmlA的序列设计了三对引物，确定了反应体系中最佳的引物浓度、MgCl2浓度以及dNTP浓度，优化了三重PCR的反应条件，筛选出了阳性对照。使用本试剂盒检测同一批样品三次结果一致，显示出较高的重复性；能检测出耐药基因的细菌的最低浓度为6.0×102 个拷贝/25μl；最佳保存条件是酶与反应体系分开装配，于-20℃冷冻保存，至少可以保存半年。应用该试剂盒检测猪源大肠杆菌57株，8个鸡场分离的鸡源大肠杆菌50株，Cat1、FloR、CmlA三种基因的检出率分别是41.1％、51.4％和36.4％，与药敏试验结果基本符合。本试剂盒对氯霉素类耐药基因的传播、流行调查以及在临床用药方面具有重要的指导意义。
细菌耐药性 三重PCR检测 耐药基因 氯霉素类药物 毒副作用 临床用药
杨鑫 王红宁 黄勇 柳萍 张安云 周万蓉 夏青青
四川农业大学动物科技学院，雅安 四川 625014 四川大学“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台，四川大学生命科学学院，四川大学动物疾病防控生物工程研究中心，成都，610064
国内会议
成都
中文
301-304
2007-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）