超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达
目的：构建重组PET-30a-SEB原核表达载体，转化感受态大肠杆菌BL-21(DE3)，诱导表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B，SEB)。 方法：利用PCR技术从产SEB的金黄色葡萄球菌标准菌株CMCC-26075基因组DNA中克隆SEB全长序列，将其克隆到PGEM-T easy载体中并进行测序。构建PET30a-SEB原核表达质粒，转化感受态大肠杆菌BL21(DE3)，异丙基硫代β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside，IPTG)诱导表达，经镍离子螯合亲和层析纯化后免疫鉴定。 结果: PCR获得超抗原SEB基因片段，与克隆载体连接后经测序与文献报道的基本一致；成功构建了PET30a-SEB原核表达质粒且成功诱导表达出分子量约31KDa的蛋白。 结论: 本研究成功克隆了SEB全长序列，并进行了原核表达和鉴定，获得了SEB蛋白，为后续对超抗原SEB的进一步研究奠定基础。
金黄色葡萄球菌 肠毒素基因B 超抗原 基因克隆 原核表达 PCR 免疫印迹 生物制品
王丽婵 张庶民 余模松 杨晓明
中国药品生物制品检定所血清室 武汉生物制品研究所 中国药品生物制品检定所血清室 武汉生物制品研究所
国内会议
北京
中文
437-440
2007-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）