含HIV-1核心蛋白基因的重组质粒的构建及其免疫应答的研究
目的：构建含有HIV- 1核心蛋白gag基因的真核表达质粒，并研究其免疫应答反应。 方法：采用PCR方法从一例HIV感染者中扩增出gag基因，构建重组质粒pcDNA-GAG。接种小鼠后，检测其抗体及抗体亚类，并对小鼠的淋巴细胞亚群进行分析，并采用3H-TdR法、ELISPOT方法和51Cr释放法分别检测T淋巴细胞的增殖反应性、特异性分泌IFN-γ的CD8+T淋巴细胞以及特异性CTL杀伤活性。 结果: 重组质粒体外表达目的蛋白的分子量约为55kD。免疫小鼠后可诱导产生特异性抗体，其中IgG2a与IgG的比例显著高于IgG1与IgG的比例；T淋巴细胞体外经ConA刺激后SI达到160.67，显著高于对照组(14.04)(P＜0.05)；产生IFN-γ的CD8+T淋巴细胞数目以及特异杀伤率均显著高于对照组小鼠(P＜0.05)。 结论: 重组质粒pcDNA-GAG可诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应，而且ELISPOT方法检测特异性细胞免疫应答反应的结果与51Cr释放法一致，提示可用此法对DNA疫苗诱导的细胞免疫进行评价。
HIV-1 核心蛋白 DNA疫苗 免疫应答 酶联免疫斑点法 PCR扩增 生物制品
张春涛 王佑春 尹红章 李德富 王嘉玺
中国药品生物制品检定所,北京,100050 军事医学科学院
国内会议
北京
中文
429-433
2007-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）