N端信号肽残余氨基酸对人凝血因子VⅡ蛋白在毕赤酵母中表达的影响
目的：比较N端信号肽残余氨基酸对人凝血因子Ⅶ蛋白在毕赤酵母中表达的影响。 方法：构建表达蛋白N端信号肽残余氨基酸不同的两种重组表达质粒pPIC9K/FVII和pPIC9K/Glu-Ala-Glu-Ala-FVII，电转化入两种毕赤酵母宿主菌GS115和SMD1163，经甲醇利用表型鉴定，挑取Mut+表达阳性重组菌株，甲醇诱导目的蛋白的表达，经Western blot检测蛋白的特异性，以比较N端均一性对目的蛋白表达的影响及其在不同菌株中表达情况的差异。 结果: 两种重组质粒在两种酵母菌株中均可表达FVII蛋白，N端信号肽残余氨基酸不影响FVII蛋白在毕赤酵母中的表达；GS115菌株的表达量高于SMD1163菌株中的表达量。 结论: N端不含信号肽残基结构的重组子在GS115菌株中分泌表达FVII蛋白的情况最为稳定，有利于进一步进行人凝血因子Ⅶ在毕赤酵母中表达的研究。
人凝血因子Ⅶ 毕赤酵母 N端均一性 蛋白表达 特异性 生物制品
蔡蓓蓓 楼觉人 朱威
上海生物制品研究所,上海,200052
国内会议
北京
中文
253-258
2007-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）