人T淋巴细胞CD3ε链在大肠杆菌中的融合表达及初步鉴定
目的:构建含人CD3ε基因的重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21中进行表达。 方法:RT-PCR扩增健康成人外周血单个核细胞的CD3ε基因,将其插入克隆载体PCR(@)-Ⅱ,测序并双酶切后,再将目的基因片段重组人表达载体PGEX4T-3,转化大肠杆菌BL21,经IPTC诱导,表达人CD3ε-GST融合蛋白,并经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。 结果: IPTG诱导含重组质粒的大肠杆菌BL21经SDS-PAGE出现明显的46KD蛋白条带并能与兔抗人CD3ε多抗产生特异性反应。 结论: 成功构建了人CD3ε-GST(hCD3ε-GST)原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达出人CD3ε-GST融合蛋白,为制备抗人CD3ε单克隆抗体奠定了基础。
人CD3ε基因 融合蛋白 原核表达 RT-PCR 鉴定指标 T淋巴细胞 单克隆抗体 生物制品
金玉玲 张爱华 闭兰 赵亚杰
武汉生物生物制品研究所,武汉,430060
国内会议
北京
中文
353-357
2007-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)