载基因壳聚糖纳米粒的制备及免疫增强作用的初步研究
目的:制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外转染效率及其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。 方法:以本课题组构建的口蹄疫DNA疫苗为模型药物,采用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位;凝胶阻滞分析测定基因在纳米粒中的位置;用体外基因转染实验评价纳米粒的转染活性。用载基因壳聚糖纳米粒免疫雌性Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫水平. 结果:所制备的载基因纳米粒形态规则、大多成球形,平均粒径约为150nm,多分散度<0.26,zeta电位约为21mV;凝胶分析结果表明质粒DNA与壳聚糖分子间可以通过电性结合作用而完全结合,基因几乎全部被包襄在纳米粒内部;体外基因转染实验表明壳聚糖作为一种新型的非病毒基因递送载体能够高效传递DNA进入BHK-21细胞,基因能够在该细胞中高效表达;小鼠免疫实验表明纳米粒不仅能诱导机体产生较高的细胞免疫水平,而且体液免疫水平也显著提高。 结论:壳聚糖纳米粒能将基因递送到细胞内并且能够表达,小鼠免疫实验显示其具有良好的免疫增强效果。
壳聚糖 纳米粒 免疫原性 免疫增强 基因转染
计越 金宁一 鲁会军 马鸣潇 金明兰 李旭 刘慧娟 郑敏
军事医学科学院全军基因工程重点实验室,吉林长春,130062 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062;军事医学科学院全军基因工程重点实验室,吉林长春,130062;辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州,121001 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062;军事医学科学院全军基因工程重点实验室,吉林长春,130062
国内会议
江西井冈山
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1134-1137
2007-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)