MGB(Minor Groove Binder)复合探针二重实时定量PCR检测大肠杆菌O157

摘要：

以大肠杆菌O157rfbE和stx2为待检靶基因,设计两对引物和两条MGB探针,rfbE和stx2探针5”端分别用FAM和VIC基团标记,3”端均用Taqman-MGB标记.建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法,可检测的最低DNA浓度是101拷贝/uL；试验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性,而非O157菌株检测结果均为阴性；重复性实验中,批间差异小于80％,批内差异小于70％。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定,同时得知菌株是否携带stx2毒力基因,有利于菌株毒力强弱的判定。

关键词： 大肠杆菌 荧光定量PCR检测 复合探针 菌株检测

作者: 朱向玲 严亚贤 陆承平 刘佩红 王建 沈莉萍

作者单位: 上海交通大学农业与生物学院,上海,201101;南京农业大学动物医学院,南京,210095 上海交通大学农业与生物学院,上海,201101 海市畜牧兽医站,上海,200003

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

会议地点: 江西井冈山

会议语种:中文

页码: 1007-1011

在线出版日期: 2007-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）