犬常见传染病诊断基因芯片的研究与应用
采用PCR技术扩增出犬腺病毒(CAV)ORF1(p-Ⅷ)基因、犬细小病毒(CPV)VP2基因、鸡血红蛋白的珠蛋白基因(GLOBc)各保守基因片段；采用RT-PCR扩增出犬冠状病毒(CCV)纤突蛋白(S)基因、犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白(F)基因、犬副流感病毒(CPIV)核衣壳结构蛋白(NP)基因、狂犬病病毒(RV)核蛋白(N)基因的各一段保守序列,克隆获取质粒.通过微量点样技术将这些质粒作为探针点。在硝酸纤维膜上,产生二维DNA探针阵列,制作成诊断基因芯片.对360份待检样品匀浆后提取核酸作为模板,扩增相应保守基因片断.通过生物素标记PCR(RT-PCR)技术,将所获得的扩增产物与诊断基因芯片进行特异性的逆向点。杂交,然后用扫描仪对芯片进行扫描分析、判断.结果表明,此方法比病毒分离、HI、PCR或RT-PCR方法灵敏度高、特异性强,平均检出率要高20％以上,并可同时对犬多种疫病进行快速诊断.
犬传染病 基因芯片 快速诊断 犬病毒
吴时友 张伟 尹燕博 牛钟相
山东澳兰生物工程研究院,山东,青岛,266101 山东省农业科学院,山东,济南,250100 山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018
国内会议
江西井冈山
中文
1041-1044
2007-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）