传染性法氏囊病病毒多表位模拟肽串联基因的表达与免疫原性分析
用5株传染性法氏囊病病毒(IBDV)单克隆抗体(mAb)从噬菌体随机肽库中得到了5个含有不同IBDV抗原表位的模拟肽序列.在此基础上,将5个抗原表位用GGGS四肽连接构建多表位基因5epis.将该基因合成、克隆后,构建原核表达质粒pET-5epis,在大肠杆菌中表达重组多表位蛋白r5EPIS,经SDS-PAGE分析,r5EPIS占菌体总蛋白的15％、分子量10kDa.用IBDV单克隆抗体和多克隆抗体对r5EPIS进行免疫印迹对比分析,结果表明,r5EPIS具有IBDV特异性和免疫反应性。将r5EPIS经皮下注射免疫兔,400μg/只/次,免疫2次,间隔7d,用IBDV间接ELISA检测血清抗体,第一次免疫7d后抗体效价为1∶4000,第二次免疫14d后抗体效价升高到1∶256000,说明r5EPIS可诱导机体产生IBDV特异性抗体。用r5EPIS加免疫佐剂经肌肉注射免疫鸡,50μg/只/次,免疫2次后,血清抗体效价可达到1∶12800,用200个ELD50IBDV超强毒株GX8/99攻击实验鸡,r5EPIS免疫组全部存活,而对照组的死亡率为93.3％(14/15),证明r5EPIS可诱导机体产生抗IBDV感染的保护性免疫应答,预示构建的5epis可作为IBD多表位疫苗研究的候选基因。
鸡传染性法氏囊病病毒 抗原表位 免疫原性 大肠杆菌 血清抗体
王永山 范红结 张晓民 李银 肖焕娟
南京军区军事医学研究所,南京军区疾病预防控制中心,南京,210002;江苏省农业科学院兽医研究所,南京,210014 南京农业大学动物医学院,南京,210095 南京军区军事医学研究所,南京军区疾病预防控制中心,南京,210002 江苏省农业科学院兽医研究所,南京,210014
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2007-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）