鸡痘病毒重组转移载体的构建与鉴定
在鸡痘病毒作为载体的研究中需要解决以下几个问题:外源基因的表达水平;筛选重组病毒的方法和病毒非必需区的筛选及优化选择。在重组病毒的筛选中TK基因的插入失活是一种比较准确的方法,但是这种方法存在许多不足:TK基因的失活会减弱病毒的感染力并且需要TK-的细胞系和筛选压力,除此之外TK基因的自发突变也不断发生,因此在本实验中选用了另外一个筛选基因,即gpt,它的基因产物可以解除MPA对于病毒嘌呤代谢途径的抑制剂,使病毒可以在MPA存在的条件下进行复制,所以含有gpt的重组病毒可以形成明显的噬菌斑从而筛选出重组病毒.这种方法可以克服TK基因的所有缺点。而且安全有效。在启动子方面,根据国内外的文献,优选了几个痘病毒的强启动子,同时考虑到作为应用于人体的病毒载体,筛选标记基因的存在可能影响其安全性的评价,因此实验中设计通过二次重组的方法将筛选标记基因去除。
鸡痘病毒 免疫原性 病毒载体疫苗 重组病毒筛选 TK基因
金洪涛 金宁一 李臻 付延军
军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062
国内会议
江西井冈山
中文
824-826
2007-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)