C型副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定
血凝素是副鸡禽杆菌(Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序列(AF491827),设计合成了1对特异扩增Apg血凝素基因的引物.以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增出了1 026bp的血凝素基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建了pET-HA原核表达质粒并在BL21大肠杆菌中过量表达。通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体,表达并纯化了Apg重组血凝素蛋白,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞.为进一步研究副鸡禽杆菌血凝素的免疫功能奠定基础。
副鸡禽杆菌 血凝素 原核表达 生物活性 基因克隆
王宏俊 安烨 龚玉梅 陈小玲 张培君
北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097;首都师范大学生命科学院,北京,100037
国内会议
江西井冈山
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720-723
2007-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）