鹅源副粘病毒与鹅细小病毒主要免疫原性基因在Bac-to-Bac系统中的共表达及其免疫研究
根据测得的鹅副粘病毒(GPMV)NA-1株F基因序列,设计一对特异性引物,用作者构建含F基因的质粒pGF为模板,PCR扩增F基因片断(去除终止密码子),与转座载体pFastBac Ⅰ连接,构建重组质粒pFastBac-F,并进行测序鉴定;根据测得的鹅细小病毒(GPV)GD-01株VP3基因序列,设计一对特异性引物,用作者构建的重组质粒pGVP3为模板,PCR扩增带有Linker的VP3基因,命名为LVP3.再将重组质粒pFastBac-F与LVP3片段连接,构建重组转座载体pFF-LVP3,转化到DH10Bac宿主菌,将目的基因定向插入到Bacmid质粒中,经筛选获得的重组Bacmid F-L-VP3转染Sf9昆虫细胞,并进行检测。结果,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测获得蛋白特异条带,相当分子量约12 3kDa.将表达蛋白免疫雏鹅,经抗体测定,证明表达的F-VP3重组蛋白能诱导机体产生特异性免疫应答。
鹅副粘病毒 鹅细小病毒 杆状病毒 免疫原性 基因序列
毕玉海 丁壮 李志杰 徐明
吉林大学预防兽医学国家重点学科,动物重要病原与疫病研究室,吉林长春,130062
国内会议
江西井冈山
中文
690-692
2007-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)