H3、H9亚型流感病毒多表位核酸疫苗毒构建及其表达研究
构建流感病毒多表位的的核酸疫苗,并研究表位基因在BHK细胞内表达产物的生物学活性。筛选流感病毒主要抗原(HA NA NP M)优势抗原表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构合成流感通用多表位基因(Epi),然后定向克隆至真核表达载体pVAX1的CMV启动子下游,构建多表位核酸疫苗pVAX1-Epi.最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞全RNA,以RT-PCR方法目的基因;以间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白免疫印迹分析(Westblotting)检测其表达产物抗原性。RT-PCR检测到目的基因;IFA检测到特异性荧光存在;Westblotting检测到目的蛋白条带.本试验所构建的重组质粒pVAX1-Epi,在真核细胞内均获了有效地转录和表达;而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望能针对H3、H9亚型流感病毒提供保护。
流感病毒 核酸疫苗 表位基因 蛋白免疫印迹
陈义锋 金宁一 赵建增 田明尧 鲁会军 南文龙 赵翠青 霍晓伟
大北农集团生物制品事业部动物医学研究中心,北京,100085 解放军军事医学科学院11所,全军基因工程重点实验室,长春,130062
国内会议
江西井冈山
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638-640
2007-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)