猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体的制备与特性分析
采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/C小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得三株稳定分泌抗PRRSV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,命名为A61、B47和C65.三株单抗的亚级份分别为IgG1、IgG3和IgG1,均具有ELISA、IFA和Western blot特性,细胞上清液和腹水的ELISA抗体效价分别为26~28和105~106.IFA测定表明A61和B47可与PRRSV-FZ和PRRSV-V2332反应,不与PRRSV-FJ-1反应;而C65与供试的三株PRRSV均呈免疫荧光阳性。特异性测定表明三株单抗与Marc-145细胞、猪2型圆环病毒和猪细小病毒均无交叉反应。Western blot测定表明三株单抗均能识别PRRSV-GP5蛋白。上述结果表明三株单抗均能特异性地识别PRRSV毒株,为PRRS免疫诊断试剂盒的研制奠定基础。
猪繁殖呼吸综合征病毒 单克隆抗体 免疫诊断 特异性测定
陈仕龙 林天龙 陈少莺 庄向生 王隆柏 魏宏 周伦江 车勇良 黄梅清
福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,福建,350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福州,福建,350013 福建省农业科学院生物技术研究所,福州,福建,350013;福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福州,福建,350013
国内会议
江西井冈山
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260-263
2007-09-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)