人穿孔素N端肽段在真核细胞中的放射诱导表达研究
目的：构建人穿孔素N端(hPFN-N)的真核放射诱导表达载体,并在放射诱导条件的刺激下研究hPFN-N的表达产物(rhPFN-N)在肺癌细胞SPC-A1中的分布及其对该细胞的细胞毒性作用。 方法：以克隆有hPFN全长cDNA序列的载体pcDNA3.1(+)/hPFN为模板,用PCR扩增hPFN-N,将该基因片断克隆到含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-1中,以重组体稳定转染SPC-A1细胞,经过X射线的放射诱导后,应用RT-PCR、细胞免疫化学法检测hPFN-N蛋白的表达,用MTT法测定该蛋白对靶细胞的杀伤活性。 结果：成功构建了真核放射诱导表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N.以重组体转染SPC-A1细胞后,用RT-PCR检测到hPFN-N mRNA的表达。细胞免疫化学法检测结果呈阳性反应,MTT法检测结果为rhPFN-N对靶细胞的杀伤活力为29.2％。 结论：构建了pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N真核放射诱导表达载体,在经过X射线的放射诱导后,hPFN-N能够在SPC-A1细胞的细胞膜上大量表达,表达产物rhPFN-N对靶细胞有明显杀伤活力。
穿孔素 放射诱导 杀伤活性 肺癌 细胞毒性 细胞免疫化学
张蕾 李芳秋 韩艳玲 朱锡旭
南京军区南京总医院全军检验医学研究所 南京军区南京总医院放射治疗科,南京,210002
国内会议
南宁
中文
104-108
2007-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）