双歧杆菌表达系统的构建及其鉴定
目的:构建可以在双歧杆菌表达外源性基因的系统. 方法:PCR扩增双歧杆菌质粒聚合酶基因(BPP)并连接至质粒pBS-T以形成重组质粒pBS-BPP.PCR扩增双歧杆菌内源性阿拉伯糖苷酶的启动子及分泌性信号肽DNA序列(ara)并连接至质粒pBAD-A以形成重组质粒pBAD-ara,然后将增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因连接至质粒pBAD-ara以形成重组质粒pBAD-ara-GFP.采用基因重组技术重组含有ara、BPP、eGFP基因序列并可将外源性基因分泌表达于菌体外及锚定表达于细胞壁的质粒pBS-BPp-ara-GFP,激光共聚焦显微镜下观察含有pBS-BPP-ara-GFP质粒及对照质粒的E.coli,验证eGFP定位表达情况。 结果:所构建的表达系统可以在E.coli中表达eGFP基因。 结论:通过基因重组方法成功构建了双歧杆菌表达系统,其可将外源基因分泌表达于菌体外。
双歧杆菌 系统构建 外源性基因 基因重组 eGFP定位
王立生 朱忠生 曾位森 郑跃杰 罗深秋 李迎雪 姜泊 潘令嘉 周殿元
暨南大学第二临床医学院,消化科,518020 中国医科大学,深圳市儿童医院,内科,518026 南方医科大学,细胞生物学教研室,510515 南方医科大学,南方医院消化科,510515
国内会议
广州
中文
86-90
2007-06-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)