蚓激酶重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LKR的构建及其在奶牛乳腺组织中的表达
本研究构建了含有蚓激酶基因cDNA的重组逆转录病毒载体pLN-BCP-LKR,以200μg、500μg、1000μg、2000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,转染泌乳期奶牛乳腺组织获得暂时表达,并以500 μg为最佳表达剂量。利用脂质体转染PA317包装细胞,通过G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后收集病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104 CFU/mL。再用收获的病毒上清转染妊娠期奶牛乳腺组织,产后奶样经FAPA法检测蚓激酶活性。结果表明,牛奶具有明显的纤溶活性,即蚓激酶基因已经整合到奶牛乳腺组织并能实现相对稳定的表达。
奶牛养殖 蚓激酶基因 逆转录病毒 基因表达
周兴 张居农
石河子大学动物科学技术学院,石河子,832003
国内会议
南京
中文
116-119
2007-06-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)