人骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定
目的:建立一种简便可行的人骨髓间充质干细胞的体外培养扩增方法，并就人骨髓间充质干细胞的表型、细胞周期、生长曲线、超微结构、核型等方面进行初步鉴定. 方法:应用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞，条件培养基培养.相差显微镜下观察HMSCs形态学变化；流式细胞仪检测HMSCs的表面标记以及细胞周期；绘制HMSCs的生长曲线，计算细胞倍增时间；扫描电镜和透射电镜观察HMSCs的超微结构；Giemsa染色检测HMSCs的细胞核型. 结果:密度梯度离心法能分离出纯度较高的HMSCs.HMSCs贴壁生长，以长梭形为主.细胞存活率均大于95％.流式细胞仪检测HMSCs CD29、CD34、CD44、CD45、CD71、CD105、CD166、HLA-ABC、HLA-DR、UEA-1阳性表达细胞比率分别为95.3％、1.8％、94.7％、0.8％、96.2％、96.6％、92.7％、96.3％、1.1％、98.7％.HMSCs的生长曲线呈S形，在传代7代之前具有较好的生长特性.超微结构显示HMSCs表面较多突起，孔隙较多，胞质丰富，粗面内质网发达，囊腔扩张，可见大量蛋白分泌物.核型分析显示第3、6代HMSCs的染色体数量和形态均未发生变化. 结论:应用密度梯度离心法可得到纯度较高的HMSCs，能表达人骨髓间充质干细胞的表型特征.HMSCs能在体外较长期培养细胞染色体数目未发生改变.
骨髓间充质干细胞 分离培养 生物学鉴定 细胞染色体 超微结构
王忠 高毅 汪艳 潘明新
510282,南方医科大学珠江医院普外科
国内会议
广州
中文
84-88
2007-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）