50L规模中试发酵重组核苷二磷酸激酶A工程菌
中试规模生产重组人核苷二磷酸激酶A(rhNDPK-A).摇瓶培养一级种子至OD500为5.0～5.5，以10％的比例接种二级种子培养基，在7L发酵罐中培养至OD500为9.6～10.5，然后转入80L发酵罐中进行补料分批培养，所得菌体经过高压匀浆后，微滤去除菌体残渣，所得样品超滤浓缩后经离子交换层析和亲和层析两步纯化得重组蛋白制品.结果表明，50L培养液经过10h培养后，湿菌收量为31.27 g/L，1560 g/批，NDPK-A表达量为23.8％.另外，补料方式对发酵密度有明显影响.与单纯补加碳源相比，同时补加碳源和氮源可以显著提高菌体产量，但对目的蛋白表达量的提高不明显.在较优条件下，菌体密度为(38.30±0.28)OD500，菌体产量为(2220.00±169.71)g/批、(44.4±3.4)g/L，蛋白表达量为(22.00±0.42)％.中试规模制备重组rhNDPK-A为NDPK-A的基础研究和新药开发奠定了物质基础.
核苷二磷酸激酶 发酵重组 重组蛋白制品 中试规模 新药开发
熊盛 钱垂文 黄立 刘秋英 张美英 王一飞
暨南大学药学院制药工程教研室;暨南大学生物医药研究开发基地,广东广州,510630 暨南大学生物医药研究开发基地,广东广州,510630
国内会议
北京
中文
393-399
2006-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）