免疫组织化学显色反应强度定量理论、方法及应用解析
本文解析了用于定量表达免疫组化阳性反应程度的阳性单位(Positive Unit,PU)新概念.本文将排除了切片或涂片本底因素后的纯免疫组化反应程度按灰度图像分为0(白)到100(黑)个等级,每一等级定义为1个阳性单位.PU值大小与反应强度成正比,PU最大值为100、理论最小值为0.从实际测试应用考虑,我们进一步发展了免疫组化染色定量测试方法,导出阳性单位(PU)测算新公式,使之能适于两种截然不同的灰度设定,并得到相同的阳性单位值,公式如下: PU=|GαGβ|/Gmax×100 (1)PU=|GA-Gβ|/AAα·Gmax×100 (2)PU=|Gα-GA|/AAβ·Gmax×100 (3)式中Gα、Gβ和GA分别为不考虑灰度设定方法但在相同灰度设定时待测阳性产物α、背景β和由α、β区构成的A区域范围的平均灰度,AAα为α相在A区域中的面积密度,AAα=n/(m+n),AABβm/(m+n),Gmax为测试仪器的最大灰度分级.根据Gα、Gβ,或据测试区域A的灰度级GAα和面积(m+n)及阳性反应产物α相的灰度级Gα和面积n(或背景β相的灰度级Gβ和背景面积m)即可求得PU.本法灰度测试无需考虑灰度设定方法,只需在同一灰度设定条件下测试即可.式(1)适于测算境界明显的粒子,式(2)、(3)对境界明显或边界模糊不清的反应区均适宜.对组织学切片和细胞学涂片的免疫组化显色反应的定量测试均适宜.本法还可用于其它组织化学、细胞化学和原位分子杂交反应显色程度定量.举例说明了阳性单位的具体应用中的测算方法.讨论了PU值的意义和有关对比染色问题.
免疫组织化学 图像分析 形态定量 阳性单位 定量表达
申洪
南方医科大学病理学教研室,广州,510515
国内会议
宁波
中文
23-27
2006-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）