油茶种子cDNA文库的构建
本文以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RNA;经磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质粒载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测文库容量达106以上,重组率为88.21%;测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为今后进一步研究奠定了很好的物质和技术基础.
油茶 文库构建 反转录酶 成熟种子
胡芳名 谭晓风 石明旺 乌云塔娜
中南林业科技大学,国家林业局经济林育种与栽培重点实验室,长沙,410004 中南林业科技大学,国家林业局经济林育种与栽培重点实验室,长沙,410004;河南职业技术师范学院,河南,新乡,453003
国内会议
长沙
中文
315-319
2004-10-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)