猪胰岛素样生长因子-ⅠmRNA实时荧光定量PCR定量标准的构建

摘要：

本文采用RT-PCR的方法利用肝组织提取的总RNA制备猪胰岛素样生长因子Ⅰ(pIGF-Ⅰ)cDNA目的片断,与pMD-18T vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.联合应用PCR鉴定、a互补法、限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.测定纯化的重组质粒A260,确定浓度并以此制备实时荧光定量PCR(FQ-PCR)梯度浓度参考标准.结果表明:pIGF-Ⅰ cDNA目的片断成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片断序列的特异性和完整性,成功构建了pIGF-Ⅰ实时FQ-PCR的定量参考标准.

关键词： 猪 胰岛素样生长因子Ⅰ 参考标准 RT-PCR技术

作者: 肖书奇 戴立胜 张树敏 赵中利 孙玉成 高妍 李毅 赵志辉 张嘉保

作者单位: 吉林大学实验动物中心 吉林省农业科学院 吉林大学畜牧兽医学院

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会

会议地点: 河北保定

会议语种:中文

页码: 97-101

在线出版日期: 2006-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）