会议专题

重组DsbA表达统计优化及其协助溶菌酶体外复性研究

二硫键形成蛋白A (Disulfide bond formation protein A, DsbA) 是大肠杆菌周质胞腔中辅助多种含有二硫键的蛋白质正确折叠并具有生物学活性的一种二硫键异构酶,通过统计实验设计的方法将生产重组DsbA 的发酵过程进行了优化。首先通过Plackett-Burman 设计挑选出了对DsbA表达量影响较大的四个因素,然后再利用杂合设计进行实验,并通过拟合得到了响应曲面函数,最后经过约束优化得到了较佳的实验点,在该实验条件下DsbA的表达量比基本培养条件下提高了50﹪。纯化后的DsbA 能有效地协助变性溶菌酶体外复性,当两者浓度比为4:1时,复性后溶菌酶活性是稀释复性的1.61倍。

二硫键形成蛋白A 统计优化 Plackett-Burman设计 杂合设计 响应面法 溶菌酶 体外复性

罗曼 关怡新 姚善泾

浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江杭州310027

国内会议

第二届全国化学工程与生物化工年会

北京

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2005-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)